1

1 適用范圍：適用于各類食品、原料和純凈水等樣品中大腸菌群的快速測定。
2 方法原理 ： 將乳糖 、 顯色劑和選擇性培養(yǎng)基加載在紙片上 ， 經(jīng)培養(yǎng)后能夠在紙片上生長并發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸
的即為大腸菌群陽性 ， 記錄每個(gè)稀釋度大腸菌群陽性紙片數(shù) ， 根據(jù)大腸菌群 MPN 表查出相應(yīng)的大腸菌群數(shù) 。
3 方法特點(diǎn)：與國標(biāo)法中的九管法相對應(yīng)，將原來幾步的試驗(yàn)簡化為一步，時(shí)間由 78h 縮短為 24h 以內(nèi)，
省去了制備培養(yǎng)基、消毒和培養(yǎng)器皿的清洗處理等大量輔助性工作，隨時(shí)可以打開包裝進(jìn)行抽樣檢測。
4 操作方法
4.1 樣品處理 ： 無菌稱取樣品 25g （ 或 25mL ） 放入含有 225mL 滅菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯中 ， 經(jīng)充分
振搖做成 1 ： 10 的樣品勻液 ， 用 1mL 滅菌吸管吸取 1 ： 10 樣品勻液 ， 注入含有 9mL 滅菌生理鹽水的試管內(nèi) ，
振搖試管制成 1 ： 100 的稀釋液。以此類推，每個(gè)稀釋度更換一支滅菌吸管。
4.2 接種：選取兩個(gè)稀釋度進(jìn)行接種，普通食品一般采用 1 ： 10 和 1 ： 100 這兩個(gè)稀釋度，飲料和飲用水采
用原液和 1 ： 10 兩個(gè)稀釋度 。 每份由三片大紙片 （ 接 10mL ） , 六片小紙片 （ 接 1mL ） 組成 , 大片每小袋二張疊
放算作一片。用滅菌吸管吸取 10 mL 1 ： 10 稀釋液加到含有大紙片的塑料袋中（相當(dāng)于接樣品 1g ） ，吸透后
平放 ， 做三個(gè)重復(fù) 。 再用 1mL 滅菌吸管吸取 1 mL 同一稀釋液涂布到含有小紙片的塑料袋中 （ 相當(dāng)于接樣 品
0.1g ） ，做三個(gè)重復(fù)。再取一支 1 mL 滅菌吸管吸取 1 mL 1 ： 100 稀釋液涂布到含有小紙片的塑料袋中（相當(dāng)
于接樣品 0.01g ） ，做三個(gè)重復(fù)。
4.3 培養(yǎng)：將接種好的紙片（可疊放）放入 37 ° C 培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 15h ～ 24h 。
5 結(jié)果判斷與計(jì)數(shù)：若紙片變黃或在黃色背景上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)為大腸菌群陽性紙片。紙片保持紫蘭色不變
或在紫蘭色背景上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn) ， 但周圍沒有黃色均為大腸菌群陰性紙片 。 記錄每個(gè)稀釋度大腸菌群陽性紙
片數(shù)，根據(jù)大腸菌群 MPN 表查出相應(yīng)的大腸菌群數(shù)。如接種的*個(gè)稀釋度的稀釋液為原液，應(yīng)將表上查
出的結(jié)果除以 10 ，以此類推。
6 注意事項(xiàng)：如果樣品的酸堿度在 pH7 以下，應(yīng)先用滅菌 1mol/L 氫氧化鈉（ NaOH ）調(diào)節(jié)溶液調(diào)至中性 ， 避
免因 pH 的原因?qū)е碌募埰凕S而影響結(jié)果觀察。：李菲     :